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产品简介

本产品是采用探针嵌合荧光法(SYBR Green I)进行Real Time RT-PCR的广谱试剂。Real Time RT-PCR方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域,使用本制品可以准确简便地进行mRNA的表达分析。

本产品由反转录反应试剂和PCR反应试剂两部分构成。其PCR反应试剂部分已经将DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTP,SYBR I, ROX等试剂预混在一起,是一种2×浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。
本产品适合于ABI PRISM(7000,7300,7700,7900)、LightCycler、Smart Cycler等各种型号的Real Time PCR扩增仪。试剂盒中含有ROX Reference Dye,可用于需要Dye的Real Time PCR扩增仪。此外,本产品也适用于使用玻璃毛细管的Real Time PCR扩增仪,并且不需要再添加BSA。本产品还适合于快速Real Time PCR的扩增反应。
本产品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准定量曲线,对靶基因进行准确的定量和检测,重复性好,可信度高。
试剂盒组成
A、反转录反应试剂

Realtime PCR扩增PPAR-TA载体胶图

M:核酸分子量标准DNA markerI;
1-5:模板依次1:10稀释扩增结果
6:阴性对照

RNase Inhibitor(40 U/μl)
Oligo(dT) Primer (500μg/ml)
5X M-MLV Buffer
M-MLV RTase(RNase H free)
dNTP Mixture
RNase Free ddH2O

Bq-PCR反应试剂

经过浓度优化的目的基因引物对(见表1)

其它PCR反应常规试剂

表1: q- PCR反应目的基因列表

 Target gene name
 Full name
 Species
 BP
 Cat.Num
 GAPDH
 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
 Homo sapiens
 108
 HDMR051
 Pro-α1(Ⅰ)
 collagen, type I, alpha 1 (COL1A1)
 Homo sapiens
 143
 HDMR052
 Pro-α2(Ⅰ)
 collagen, type I, alpha 2 (COL1A2)
 Homo sapiens
 101
 HDMR053
 Pro-α1(Ⅲ)
 collagen, type III, alpha 1 (Ehlers-Danlos syndrome
 type IV, autosomal dominant)   (COL3A1)
 Homo sapiens
 117
 HDMR054
 MMP-1
 matrix metallopeptidase 1  (interstitial collagenase)
 Homo sapiens
 114
 HDMR055
 TIMP1
 TIMP metallopeptidase inhibitor 1
 Homo sapiens
 126
 HDMR056
 PPARγ
 peroxisome proliferator-activated receptor gamma
 Homo sapiens
 200
 HDMR057
 β-actin
 actin, beta
 Homo sapiens
 250
 HDMR058
 GAPDH
 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
 Mus musculus
 101
 HDMR059
 Pro-α1(Ⅰ)
 collagen, type I, alpha 1 (COL1A1)
 Mus musculus
 175
 HDMR060
 Pro-α2(Ⅰ)
 collagen, type I, alpha 2 (COL1A2)
 Mus musculus
 102
 HDMR061
 Pro-α1(Ⅲ)
 collagen, type III, alpha 1 (Ehlers-Danlos syndrome
 type IV, autosomal dominant) (COL3A1), mRNA
 Mus musculus
 189
 HDMR062
 d2EGFP
 d2 enhance green fluorescence protein
 Mus musculus
 186
 HDMR063

备注:RealmasterMix 含有荧光染料SYBR I 和本底荧光染料ROX、引物对及PCR相关试剂,用户只需加入模板即可检测。RealmasterMix也可选无引物对的2.5×RealmasterMix, 此外,SYBR I、ROX及各PCR反应试剂浓度也可根据用户需要选配。

realtime-PCR结果

图A: 10倍梯度稀释模板所得到的扩增曲线

图B: 10倍梯度稀释模板所得到的融解曲线

图C: 10倍梯度稀释模板所得到的标准曲线

订购信息
 描述
 目录号
 单位
 A、反转录反应试剂  HDMR001  50 Tests
 B、q-PCR反应试剂
 GAPDH
 HDMR051
 100 Tests
 Pro-α1(Ⅰ)
 HDMR052
 100 Tests
 Pro-α2(Ⅰ)
 HDMR053
 100 Tests
 Pro-α1(Ⅲ)
 HDMR054
 100 Tests
 MMP-1
 HDMR055
 100 Tests
 TIMP1
 HDMR056
 100 Tests
 PPARγ
 HDMR057
 100 Tests
 β-actin
 HDMR058
 100 Tests
 GAPDH
 HDMR059
 100 Tests
 Pro-α1(Ⅰ)
 HDMR060
 100 Tests
 Pro-α2(Ⅰ)
 HDMR061
 100 Tests
 Pro-α1(Ⅲ)
 HDMR062
 100 Tests
 d2EGFP
 HDMR063
 100 Tests

本试剂盒仅用于研究目的。不可用于诊断。

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